תוֹכֶן
כרומטוגרפיה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים (HPLC) היא כלי המשמש להפרדת חומרים מתערובת. ההפרדה והזיהוי של כימיקלים מסוימים מתרחשת בעיקר בעמודה הכרומטוגרפית של המערכת. סוגים רבים של עמודות זמינים עבור CLAE, וכל סוג משמש לסוג מסוים של ניתוח. עמודה C18 הוא אפולאר החזקים בשימוש בדרך כלל. לאחר שימוש ממושך במשך תקופה ארוכה של זמן, קצב הזרימה של הממס דרכו מצטמצם וזמן הניתוח גדל. סיבה נוספת לקיצור הזמן לניתוח היא לקבל דוגמאות שיניחו כמויות קטנות של כימיקלים בחומר העמודה, ובכך להפחית את היכולת להפריד ביניהם. שחזור של פני השטח שלו יכול להיעשות על ידי טיפול בחומר עם מספר ממיסים ספציפיים כדי לנגב אותו מכל מדגם הנותרים להחיות את חומר הגיבוי.
הוראות
-
הסר את העמודה C18 בכיוון הזרימה והנח אותה בכיוון ההפוך. קבלת ממס בחזרה דרך זה יהיה להקל על האפקט הצטברות המתרחשת לאורך זמן. יש להקפיד לא להשאיר יותר מדי חומר שנצבר בסוף הטור. חלק מהמפעלים משתמשים ברשת גדולה יותר בקצה העליון, כך שכאשר הזרימה משנה כיוון, הרשת נמצאת במצב למטה. שיטה זו של שיקום נקרא היפוך זרימה. כדי למנוע הצטברות הצטברות לגלאי המערכת ואולי לגרום לחסימה, אפשר לה לפעול ללא הגלאי המחובר ומכוון את זרימת העמוד לסילוקה.
-
מניחים את צינור המעבר ממס בסדרה של ממיסים כדי elute כל המתחם נשמר בעמודה בכיוון ההפוך. ממיסים אלה משתנים המאפיינים הידרופילי שלהם. על ידי שינוי אותם, תוכלו elute תרכובות של טבע hydrophilic מגוונות באותה מידה. השתמש 50 מ"ל של כל אחד ממיסים הבאים, ברציפות: מים (אם אתה משתמש חיץ), מתנול, איזופרונול, dichloromethane, הקסאן, dichloromethane ו isopropanol.
-
החלף את העמודה בכיוון הנכון יש זרימת ממס שלך דרכו. השתמש לפחות 75 מ"ל לשטוף אותו לפני שתמשיך. קח בדיקה עם דפוס שבו השתמשת כאשר זה היה חדש ולבדוק את התוצאות. שים לב כאשר אתה מגיע לנקודות השמירה המקסימלי ואת הזמן הכולל של הניתוח. המידה שבה תכונות אלה תואמות את המבחן הראשוני כאשר הוא עדיין חדש יציין את המידה שבה העמודה שוחזרה. אם התוצאות אינן משביעות רצון, להחליף את העמודה עם אחד חדש ולזרוק את אחד הישן.
מה שאתה צריך
- מים CLAE
- מתנול כיתה CLAE
- איזופרונול כיתה CLAE
- דרגת הקסאן
- DClloromethane Class CLAE
- שלב הפוך סטנדרטי