תוֹכֶן
PCR היא שיטה המשמשת את המדענים לעשות מיליוני עותקים של קטע של DNA. פולימרים - סוג של אנזים חלבון - לעזור לייצר קטעים חדשים. מדענים משתמשים לעתים קרובות פולימרז Taq ב PCR.
היסטוריה
פולימרז Taq מגיע החיידק Thermus aquaticus, אשר חי במים תרמיים. Kary Mullis ו- Fred Faloona פיתחו את ה- PCR באמצע שנות השמונים תוך שימוש במקור בפולימרים פולימרים של Escherichia coli, אך המדענים החלו להשתמש בטאק ב- PCR משום שהיה עמיד יותר לטמפרטורות גבוהות.
פונקציה
PCR כוללת את השלבים של denaturation, חישול ושכפול, חזר בדרך כלל 20 עד 30 פעמים. Denaturation מפריד את קווצה כפולה של DNA לתוך גדילים מבודדים. בשלב חישול, primers לאגד את קטעי ה- DNA להעתיק. פולימרז Taq מתחיל לעבוד על השלב של שכפול: פולימראז מרכיבה, מכל גדילה אחת של דנ"א מסומן על ידי פריימר, חוט כפול חדש.
הטבות
הטמפרטורות הגבוהות הנדרשות כדי להכחיש דנ"א הרסו את פולימראז E. coli במקור בשימוש PCR, המחייב תוספת של אנזים נוסף לכל מחזור. פולימרז Taq יכול לעמוד בטמפרטורות אלה, כך המדענים יכולים עכשיו לעשות מחזורי PCR מרובים באופן אוטומטי.
שיקולים
פולימרז Taq יש שיעור גבוה יחסית של דנ"א הכפלת שיעור השגיאה. פולימרים אחרים יציבים בטמפרטורות גבוהות יש שיעורי שגיאה נמוכים יותר, אבל Taq הוא עדיין בשימוש ביותר בגלל האמינות שלה צדדיות.